лимфоцистис у рыб лечение
Лимфоцистоз
Лимфоцистис, иначе лимфоцистоз, является хроническим заболеванием пресноводных и морских рыб, которое вызывается вирусом Lymphocystivirus или, как его ещё называют, вирусом LCDV (Lymphocystis disease virus), относящегося к семейству иридовирусов (Iridoviridae). Инфекция приводит к развитию бородавок и узелков, главным образом, на плавниках, коже и жабра, хотя встречаются и на других частях тела. Не смотря на то, что с 1874 года признаки данного заболевания зарегистрированы у множества видов рыб, его причина была идентифицирована только в 1962 году. Вирус лимфоцистоза намного менее патогенен (приводит к заболеванию), чем его родственники иридовирусы, ранавирусы и мегалоцитвирусы, которые вызывают различные системные заболевания с более высокой смертностью.
Возбудитель
Лимфоцистоз редко смертелен, однако его появление на рыбе существенно снижает товарный вид, и при сильном инфицировании приводит к гибели.
Вирус Lymphocystis зарегистрирован у 125 различных морских и пресноводных видов рыб из 34 семейств. Он отмечен у эволюционно-продвинутых костных рыб, включая цихлид (Cichlidae), рыбок кили (Cyprinodontidae), гурами (Osphronemidae), ушастых окуней (Centrarchidae), бычков (Gobiidae), рыб-бабочек (Chaetodontidae), рыб-клоунов и ласточек (Pomacentridae), псевдохромисов (Pseudochromidae), снука (Centropomidae), горбылевых (Sciaenidae), морского окуня (Serranidae) и многих других.
Лимфоцистис не затрагивает более древних существ, например, сомообразных (отряд Siluriformes), золотых рыбок, барбусов и данио (семейства Cyprinidae) и лососевых (семейство Salmonidae).
Симптомы
Отчетливыми признаками болезни является наличие мелких или средней величины узелков и бородавок на плавниках, коже и жабрах, которые имеют неправильную форму. Они могут иметь кремовый или сероватый оттенок, либо быть других цветов, если появились на окрашенном участке тела. Наросты обычно появляются в течение дня и остаются в течение недели.
Африканская цихлида с узелками лимфоцистоза (илл. Roy Yanong).
Рыба-клоун с с узелками лимфоцистоза (илл. Roy Yanong).
Кроме того, иногда наблюдается пучеглазие (экзофтальмия), вызванное нарастаниями в задней части глазного яблока.
Особи с признаками лимфоцистоза по своему поведению не отличаются от нормальных. Тем не менее, при большом количестве узелков на теле и плавниках, либо, если они покрывают значительную часть жаберных крышек, появляются трудности передвижения и дыхании.
Узелки представляют собой группу увеличенных в размере инфицированных клеток фибробластов, которые входят в состав соединительной ткани рыб. Эти зараженные клетки, являясь «фабрикой по сборке вирусных частиц», в 50000-100000 раз больше по объему нормальных фибробластов. После заверения синтеза вирусных частиц клетка-хозяина разрывается и выпускает вирус в среду.
Нормальные фибробласты имеют примерно 0,01 мм в диаметре. С другой стороны, некоторые инфицированные клетки могут иметь диаметр 0,1-2 мм. Каждая из них покрыта толстой мембраной. Так как фибробласты являются частью соединительной ткани, они обнаруживаются повсеместно в организме, поэтому лимфоцистоз также отмечается снаружи и внутри тела. Тем не менее, чаще вирус поражает именно фибробласты в покровах, коже, плавниках и жабрах.
Срез нефиксированной ткани. Микроскопический снимок на плавниках голубого гурами (илл. Roy Yanong).
Срез нефиксированной ткани. Крупный участок лимфоцистоза рыбы-клоуна (илл. Roy Yanong).
Диагностика
Для постановки диагноза лимфоцистоза необходимо не только зарегистрировать бородавки на коже, жабрах и плавниках, но также провести их биопсию. Для этого аккуратно удаляют один их узелков и изучают под микроскопом. Приблизительная диагностика лимфоцистоза строится на наличии круглых, либо овальных, часто слипшихся друг с другом, структур.
Рыбки также могут быть инфицированы вирусом, однако не иметь видимых повреждений. В данном случае лимфоцистоз затрагивает небольшое количество клеток, либо внутренние органы, например, глаза, селезенку и другие органы. Тогда приходится рассматривать не только влажные анатомические препараты, но использовать электронную микроскопию, гистопатологию и молекулярные методы.
Точная диагностика возможна только в профессиональной лаборатории.
Проблема идентификации данного вирусного заболевания осложняется тем, что его легко спутать с другой инфекцией. Когда узелки мелкие, они напоминают внешние проявления ихтиофтириоза (Ichthyophthirius multifiliis), криптокарионоза (Cryptocaryon irritans), поражения дигенетическими трематодами, либо тяжелой инфекцией, вызванной эпистилисом (Epistylis), колониальных ресничных простейших. Узелки также легко спутать с эпителиоциститом (внутриклеточное бактериальное заболевание), выростами грибков, либо выделением слизи. Более того, некоторые формы кожных новообразований (рак) очень похожи на лимфоцистоз.
Заражение
Распространение данного вируса осуществляется при контакте рыб друг с другом или с зараженной тканью. Внешние травмы при нересте, драках, деятельности паразитов и неаккуратном обращении аквариумистом способствуют распространению патогенного организма и усугубляют его проявления. Кроме того, скученность рыбы, длительная транспортировка и другие стрессовые ситуации являются пусковым механизмом в развитии заболевания. Лимфоцистоз не передается за счет вертикального переноса, от родителей детям через сперму и икринки.
Хотя этиология заболевания изучена не полностью, предполагается существование генетических вариаций или «видов», вызывающих лимфоцистис вируса. Каждый из них является видоспецифичным. Вследствие сложностей изучения вируса, на сегодня эксперты заявляют только об одном виде LCDV-1. Тем не менее, некоторые исследователи сходятся на мнении о существовании LCDV-2 и LCDV-C видов, но эта гипотеза не принята большинством.
Основываясь на клинических наблюдениях с комплексом видов рыб и других эпизодических свидетельствах, можно предположить существование дополнительных вариаций вируса и/или различий в индивидуальной чувствительности конкретных видов рыб. В смешанной естественной или аквариумной группе рыб, обычно болеют один или два вида. Тем не менее, в экспериментальных условиях путем выдерживания с зараженной тканью удалось инфицировать множество видов.
Лимфоцистоз является самоограничивающимся заболеванием, и, в большинстве случаях, у тепловодных рыб повреждения очищаются спустя несколько недель (вплоть до 6 недель в холодной воде, либо у холодноводных видов). Однако неприглядный вид бородавок не позволяет продавать рыбу в течение этого времени. Если повреждения захватывают значительную площадь покровов, например, жабр, они усугубляют ситуацию, открывая ворота вторичным бактериальным, паразитарным и грибковым инфекциям.
Лечение
На сегодняшний момент, не существует надежного лекарства, которое бы избавляло от лимфоцистоза. Чаще всего, болезнь проходит сама в течение нескольких недель, при условии, что вода имеет высокое качество, поддерживается оптимальная плотность посадки, видовой состав и рацион питания.
Так как лимфоцистоз развивается в тех тканях, которые удалены от иммунных клеток организма, находятся на периферии, вдали от кровеносных сосудов, и покрыты толстой гиалиновой мембраной, скрывающей инфицированные клетки, иммунный ответ не развивается до момента разрыва клеток, и выхода вирусных частиц в среду. Имеются сведения, что у рыб, зараженных лимфоцистозом, развивались менее выраженные повреждения в случае вторичного контакта с вирусом.
Отбраковка больных особей способствует снижению давления со стороны патогенного организма и, соответственно, снижает степень заражения. Однако эта процедура затруднена, вследствие ненадежности диагностирования зараженных рыб. Последние изолируются только в случаях, когда появились видимые нарушения покровов.
В целях профилактики рекомендуется проводить карантин вновь приобретенных рыб, по крайней мере, в течение 1-2 недель, предпочтительнее 30-60 дней. Во время карантина необходимо ежедневно следить за их состоянием, чтобы обнаружить любые признаки заболевания.
Как и в борьбе с другими инфекциями, необходимо быть уверенным, что качество воды и рыбоводческая практика оптимальные, отсутствует перенаселение, снижены или исключены любые стрессорные воздействия.
Необходимо использовать источник чистой воды, в которой ранее отсутствовали зараженные особи, в противном случае, риск заражения возрастает.
Следует помнить, что карповые (золотая рыбка, кои, барбусы, расборы, данио, радужная форель и двухцветный лабео), сомообразные, лососевые не подвержены лимфоцистозу.
Экспериментальные исследования продемонстрировали, что иридовирус инактивируется при выдерживании в течение 15 минут при 25 °C в растворах перманганата калия (100 мг/л и выше), формалина (2000 мг/л и выше) или белизне (200 мг/л и выше). Кроме того, вирус погибает в течение 30 минут при повышении pH до 11 единиц, либо повышении температуры до 122 °C.
Лимфоцистис у рыб лечение
Лимфоцистис
Вирус чувствителен к эфиру и глицерину, он снижает свой титр при: рН 3,0. В то же время инфекционность его остается при замораживании и ультразвуковой обработке в течение 30-90 с. Быстро инактивируется вирус при температуре 25°С, но долго не изменяет своих свойств при 4 С, а также при минус 70°С. Для длительного хранения (13-15 лет) вирус лиофилизируют или высушивают.
Патологоанатомические изменения и патогенез не изучены.
Диагноз ставят на основании клинических признаков болезни и результатов гистологического исследования, при котором обнаруживают гиалиновую оболочку, увеличенное ядро, вакуоли и включения в цитоплазме гигантских клеток.
Чтобы не спутать эту болезнь с эпителиоцистисом, необходимо вирусологическое исследование с выделением вируса на клеточной культуре рыб с последующим определением его патогенности с помощью биопробы. Возбудитель эпителиоцистиса пока не известен. Помимо морских рыб, ею болеет и карп.
Лечение лимфоцистиса не разработано, да и вряд ли оно возможно в условиях естественного воспроизводства рыб в морях и крупных водных бассейнах.
Профилактика и меры борьбы основаны на тщательном и регулярном выполнении всего комплекса общих ветеринарно-санитарных и рыбоводно-мелиоративных мероприятий, направленных на снижение численности и концентрации возбудителя болезни за счет интенсивного вылова больных рыб в очаге лимфоцистиса. Не допускается выброса обратно в море сильно пораженных рыб при промысловом лове. Больную рыбу собирают отдельно для последующего использования ее на корм животным.
Санитарная оценка. Возбудитель лимфоцистиса для человека и плотоядных животных не опасен. Рыбу из неблагополучных водоемов, если она не имеет сильных поражений и отвечает товарному виду и кондиции, допускают в пищу людям в свежем виде через сеть общественного питания или ее направляют на приготовление) консервов. Сильно пораженную рыбу по усмотрению ветеринарного врача-ихтиопатолога направляют в корм животным в проваренном виде или для переработки на кормовую муку.
Лимфоцистис у рыб лечение
Вирусное заболевание, проявляющееся в виде возникающих наростов, бугорков на плавниках и на теле. Болеют как пресноводные, так и морские виды.
Фото 1 Стрелками отмечены: А – разрастание в виде бугорка; В – разрастание в виде плоской бляшки
Возбудитель лимфоцистоза – вирус LCDV (аббревиатура полного названия Lymphocystis disease virus) из семейства Iridoviruses, к которому также принадлежат вирусы megalocytiviruses, ranaviruses, iridoviral, вызывающими более тяжелые, преимущественно с летальным исходом, заболевания аквариумных рыбок.
Лимфоцистоз (клеточная гипертрофия, лимфоцистис, гроздевидная узловатость ) относится к так называемым самоограничивающимся инфекциям – через несколько недель при хорошем уходе за рыбкой наросты исчезают и рыбка приобретает некоторый иммунитет к повторному поражению инфекцией. В случае отсутствия ухода, продолжении содержания в условиях скученности, несоблюдении требований к качеству воды и аэрации высока вероятность гибели заболевшей особи. Однако непосредственной причиной, как правило, оказываются вторичные инфекции, которые развиваются в местах лопнувших клеток, пораженных LCDV вирусами.
Для хирургического удаления наростов:
— металлический стержень, лучше всего из меди;
— спиртовка или газовая горелка.
Для медикаментозного лечения:
Растворы для дезинфекции.
В случае поражения внутренних органов рыбка обречена, поскольку заметить изменения в поведении и предположить именно это заболевание без проведения биопсии невозможно. В случае поражения жаберных тканей визуально заболевание проявится после настолько значительных разрастаний, которые повлекут оттопыривание жаберной крышки. Четкая диагностика заболевания по внешним проявлениям возможна только в случае поражения вирусами внешних поверхностей тела и плавников. При этом наблюдаются:
— на плавниках или на теле, около глаз возникают новообразования в виде плоских разрастаний или узелков, имеющих однотонную окраску в гамме от сероватого до черного;
Фото 2 Стрелкой отмечено возникновение лимфоцитозного бугра черного цвета
— возможно образование бугров и иного цвета, наиболее часто розово-красной гаммы;
Фото 3 Лимфоцитозные бугорки на хвостовом плавнике и теле цихлиды
— вокруг пораженного участка кожи наблюдается припухлость – результат происходящего разрастания соединительной ткани;
— в случае поражения тканей, находящихся за задней стенкой глазного яблока имеет место выпучивание глаза.
Сложность раннего диагностирования лимфоцистоза связана с тем, что на ранних этапах своего проявления узелки очень мелкие и очень похожи на обсыпание при ихтиофтириозе. Отличительным признаком может служить то, что при поражении ихтиофтириусом таких высыпаний, как правило, несколько, а при лимфоцистозе они единичны. Также отличительным признаком может служить поведение рыбок – при лимфоцистозе они не проявляют беспокойства, не чешутся. На лимфоцитоз указывает и такой признак, как отпадение точек высыпания при ихтиофтириозе по мере развития трофонтов, в то время как бугорки лимфоцист постоянно увеличиваются.
Фото 4 Белый лимфоцистозный бугорок у основания грудного плавника арованы.
По мере роста новобразования при рассматривании под мощной лупой можно сделать вывод, что он как-бы чем-то наполнен изнутри. Из нароста начинаются еле заметные выделения в виде меленьких пузырьков с диаметром приблизительно с волосинку общей длинной линии пузырьков в 5-7 миллиметров.
Внешние проявления лимфоцистоза легко спутать с симптомами фибромиксомы – доброкачественного новообразования, которое внешне выглядит практически также, как и новообразования при лимфорцистозе. Визуально точно установить диагноз, особенно на ранних стадиях развития, практически невозможно. Достоверны только гистологические исследования. Дифференциацию может сделать также тот, кто уже сталкивался с лимфоцистозом. На ощупь фибромиксомы более твердые, чем разрастания, возникающие при лимфоцистозе.
Фото 6 Фибромиксома и этапы её удаления хирургическим путем
Медикаментозного лечения этого заболевания нет, опухолевидные разрастания также удаляются хирургическим путем. Однако при малейшей возможности следует провести гистологическое исследование новообразований, поскольку появление фибромиксом говорит о наличии канцерогенных веществ либо непосредственно в аквариумной воде, либо в корме.
Внешние проявления заболевания до того момента, как они приобретут характерный вид, похожий на соцветия цветной капусты или вид гроздьев похожи также на такие заболевания, как мукофимлез (эпителиоцистоз), гетерополяриоз, вызываемый стебельчатыми ресничными паразитами рода Epistylis, онкологические новообразования.
Абсолютно точная диагностика возможна только при микроскопическом изучении, поэтому лучший вариант – сделать соскоб и обратиться в ветеринарную клинику.
Фото 7 Вид клеток, пораженных вирусом LCDV под микроскопом. Стрелочками отмечены наиболее характерные клетки, в которых поселился вирус.
Возможно определение и при использовании срезов, не подвергшихся фиксации и окрашиванию.
Вирус поражает не только клетки кожных покровов, но и внутренние органы. Наиболее часто такие поражения встречаются у лялиусов (селезенка, печень), что влечет летальный исход.
Четких указаний на то, продолжать ли содержать пораженную рыбку в общем аквариуме, или перевести её в амбулаторный отсадник нет. Но если такая возможность изолировать заболевший экземпляр имеется – лучше это сделать. В аквариуме поверить условия содержания и привести их в оптимум. Также рекомендуют применять Tetra Vital, содержащий не только витамины, но микроминералы, йод, способствующие повышению иммунитета.
На форумах можно встретить мнение, что поскольку процент летальных исходов при этом заболевании низок, можно не лечить рыбок, а просто дождаться исчезновения разрастаний естественным путем. Однако, если заболевания проявилось на губах – рыбка категорически требует удаления опухоли, поскольку разрастание мешает приему корма и она в итоге погибнет от голода.
Фото 9 Скалярия с лимфоцитозными разрастаниями на верхней губе.
Заболевшие рыбки не проявляют беспокойства, насколько спокойно ведет себя в аквариуме пораженная особь можно увидеть из коротко видеоролика.
Лечение необходимо также и потому, что оставленные на произвол судьбы рыбки, даже выздоровев, становятся более восприимчивыми к иным болезням, отстают в росте. Также в литературе отмечается, что такие особи становятся разносчиками инфекции.
Возможно два типа лечения – хирургическое и лекарственное.
Хирургическое вмешательство выполняют следующим образом. Выловленную рыбку укладывают на мокрую салфетку. Используя еще одну мокрую салфетку рыбку мягко фиксируют, оставляя свободным нарост и затем быстро прижигают его металлическими стерженьками и воспаленные ткани вокруг, либо удаляют, срезая раскалённым лезвием. Вся процедура должна выполняться как можно быстро и не длиться более 30 секунд. Затем ранку обрабатываю одним из двух способов:
— ранку присыпают стрептоцидом и выдерживают до помещения в аквариум ½ минуты;
— рыбку на 20 минут помещают в раствор стрептоцида, приготовленного из расчета 500 миллиграмм активного вещества на 1 литр воды.
Наиболее часто на форумах советуют использовать стержни диаметром 22 миллиметра, однако более рациональным представляется мнение, что размер стержней должен соответствовать диаметру новообразования, которое подлежит обработке. В качестве лезвия может быть использовано лезвие из нового одноразового станочка для бритья отлично зарекомендовавшего себя среди мужчин производителя.
Такую обработку ранки стрептоцидом проводят в течение трех дней.
Фото 10 Апистограмма с лимфоцистозными разрастаниями на плавниках.
Также описаны методы успешного лечения заболевания различными препаратами.
Отмечены случаи успешного лечения лимфоцистоза препаратами SERA GmbH против вирусных заболеваний. Пораженную рыбку помещают в амбулаторный отсадник и лечат препаратом Sera Cyprinopur разработанным для лечения прудовых рыб и продающимся в AquaMegaMall.ru согласно инструкции производителя. Время лечения – пять-семь дней. Во время лечения одновременно применяют в качестве корма SERA BAKTO TABS, что улучшает процесс лечения.
В Gainesville, Florida USA успешно применили используемый в антивирусной терапии человека препарата «Acyclovir» из расчета 200 миллиграмм на 10 галлонов воды в течение 2 дней.
Статистически низкая заболеваемость лимфоцистозом по сравнению с иными болезнями сделала разработку лекарств от этого недуга ведущими фирмами производителями препаратов, направленных на лечение аквариумных рыб не очень выгодной. Поэтому основные работы по изучению и созданию методов нехирургического лечения проводятся самими аквариумистами.
Особого внимания заслуживают эксперименты энтузиастов по лечению лимфоцистоза цитокинами – молекулярными белковыми веществами, применимыми в химиотерапии онкологии и воспалений.
Достаточно хорошие результаты были получены при применении ронколейкина (другое название интерлейкин-2) по следующей схеме – проводят четыре внесения препарата через день из расчета 100 000 единиц на 10 литров воды или 50 000 единиц для лабиринтовых. Применение этого препарата оправдано не только тем, что он мобилизует иммунный ответ на переродившиеся клетки, но стимулирует общую иммунную защиту от вирусных, грибковых, бактериальных инфекций, которые часто сопровождают лимфоцистоз.
Способ передачи инфекции от одной рыбы к другой практически не отличается от такового для всех иридовирусов:
— контактным путем при соприкосновении больной и здоровой рыбок;
— проникновение вирусов в травмированные ткани, возникшие при драках, при поражении паразитами, неаккуратном обращении с рыбками;
— ослабление иммунитета вследствие стрессов;
— перенаселенность аквариума, вызывающая скученность рыбок;
— зараженность паразитическими ракообразными, очень часто начало цикла их размножения совпадает с начальными стадиями развития лимфоцистоза.
При проведении мероприятий дезинфекции исходят из того, что вирус гибнет:
— в растворе перманганата калия в концентрации 100 mg/l;
— в растворе формалина в концентрации 2000 mg/l;
— повышения кислотности свыше 11 включительно.
Советы обрабатывать аквариумы и инвентарь горячей водой вряд ли можно отнести к серьёзным, поскольку вирус прекрасно переносит температуры в 122˚С
Большинство практикующих аквариумистов, рыборазводчиков считают, что удаление заболевших рыбок из общего аквариума обязательно – в любом случае будет удален источник миллионов новых вирусов, которые постоянно изливаются из пораженных лопнувших клеток.
Фото 11 Петушок, пораженный лимфоцистозом
Для успешной борьбы с этим заболеванием проводят полную дезинфекцию аквариума:
— грунт и инвентарь (по возможности) подвергают в течение тридцати минут кипячению, но более рациональна обработка формалином;
К профилактическим мероприятиям относят создание оптимальных условий для жизни:
— соответствующее потребностям вида качество воды (рН, жесткость общая и карбонатная);
— наличие укрытий, плотность заселения, оптимальная социальная группа;
— отсутствие контактов с заражёнными рыбками;
— профилактика заболеваний аквариумных рыб.
Возбудитель, интересное для знатоков
Инфицировав клетку своей нуклеиновой кислотой, вирус начинает контролировать процессы синтеза белков и изменяет функциональность клетки, превращая её в фабрику по производству новых частиц вирусов – белковой и нуклеиновой цепочек. Клетка начинает анормально увеличиваться в размерах, превращаясь в резервуар накопления новых вирусов. Одновременно пораженная клетка начинает покрываться оболочкой из гиалинового белка. Поскольку это вещество, являющееся фибрилярным белком, образовывается и при патологических процессах в организме человека, оно изучено достаточно хорошо. Гиалиновые капсулы устойчивы к воздействию щелочей, кислот, их образование сопровождается нарушением стандартных метаболических процессов, увеличением тканево-сосудистой проницаемости, разрушением волокнистых структур.
В норме цикл утилизации гиалина регулируется комплексом специальных ферментов. Исследователи отметили интересную особенность – при заболеваниях лимфоцистозом их количество резко уменьшается, что позволяет поражённым клеткам комфортно существовать в общей системе организма. Причина снижения синтеза этих Ферментов в настоящее время пока не выяснена.
Этот белок также принимает участие в процессах взаимодействия с клетками системы иммунитета. В частности, эту роль выполняет первичный рецептор CD44, в формировании которого принимает участие гиалин, и который позволяет иммунным клеткам отличать трансформированные клетки от нормальных. В лимфоцистных клетках эти процессы нарушены и макрофаги не уничтожают пораженную вирусом клетку, она получает время для роста до таких размеров, когда её уничтожение макрофагами становится невозможным. Интересно отметить, что эти процессы на молекулярном уровне практически схожи с процессами, происходящими в организме человека при возникновении вирусами инспирированных новообразований.
Под влиянием процессов, инспирированных вирусной нуклеиновой кислотой клетка увеличивается в объёме более чем в 100 000 раз и мембрана оболочки, не выдержав возрастающего давления, разрывается, вновь сформированные вирусы выходят в аквариумную воду и готовы инфицировать нового хозяина.
Специальной литературы и исследований о возможностях инфицирования человека вирусом LCDV в широком доступе нет, однако можно обратить внимание на упоминание известного исследователя лимфоцистоза (клеточная гипертрофия, лимфоцистис, гроздевидная узловатость ) промышленных и аквариумных рыб Adrian Lawler, который в своей обзорной статье «Lymphocystis Disease of Fishes» отметил, что во время работ по изучению заболевания он инфицировал рыбок и на его руках начали образовываться множественные бородавки. После того, как работы стали проводить в перчатках – образование бородавок прекратилось и постепенно они исчезли.